腫瘤微環境中的低氧（<5% O?）是實體瘤的典型特征，可通過激活缺氧誘導因子（HIF）通路導致化療耐藥。傳統二氧化碳培養箱僅能維持常氧環境，無法模擬腫瘤真實微環境，導致藥敏實驗結果與臨床療效存在偏差。三氣培養箱通過精確調控O?、CO?和N?濃度，可復現腫瘤低氧條件，顯著提升實驗的生理相關性。

博清生物科技（南京）有限公司研發的三氣培養箱采用進口傳感器和微機控制系統，O?濃度控制范圍1%-95%（精度 ±1%），溫度波動±0.2℃，并配備HEPA過濾和紫外線殺菌功能，為低氧環境下的長期細胞培養提供了穩定、無菌的平臺。

一、材料與方法

（一）細胞培養與分組

人胰腺癌細胞系MIA PaCa-2和BxPC-3，常規培養于含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?、常氧條件下傳代。實驗分為三組：

1、對照組：常氧（21% O?）無藥物處理；

2、常氧給藥組：常氧條件下梯度濃度吉西他濱（0.1-100 μmol/L）處理48小時；

3、缺氧給藥組：低氧（1% O?）條件下相同藥物處理。

（二）三氣培養箱參數設置

使用博清生物三氣培養箱，設定溫度37℃，CO?濃度5%，O?濃度通過氮氣調節至1%（低氧組）或21%（常氧組）。氣體濃度每小時自動校準一次，確保穩定性。

藥物敏感性檢測

采用CCK-8法檢測細胞存活率，計算半數抑制濃度（IC??）。同時，通過Western blot檢測HIF-1α和p-Akt（Ser473）蛋白表達，分析低氧誘導的耐藥機制。

二、結果

（一）低氧環境對細胞形態與增殖的影響

低氧培養48小時后，MIA PaCa-2和BxPC-3細胞呈現梭形形態，貼壁能力下降，增殖速率降低（P<0.05）。HIF-1α蛋白表達顯著上調（P<0.01），p-Akt（Ser473）磷酸化水平升高（P<0.05），提示低氧激活了Akt信號通路。

（二）低氧降低吉西他濱的敏感性

常氧條件下，吉西他濱對MIA PaCa-2和BxPC-3的IC??分別為（8.2±1.1）μmol/L和（12.5±1.8）μmol/L。低氧環境下，IC??分別升至（23.4±2.7）μmol/L和（31.2±3.5）μmol/L，敏感性下降2.3-3.1倍（P<0.01）。博清生物三氣培養箱的氣體濃度波動≤±1%，實驗重復3次的變異系數<5%，顯示出良好的穩定性。

（三）無菌控制系統的有效性

培養箱內置的HEPA過濾系統使空氣中的微生物顆粒（≥0.3μm）過濾效率達99.97%，紫外線殺菌功能在空載時可將菌落數降至0 CFU/皿，確保長期實驗無污染。

博清生物科技（南京）有限公司研發的三氣培養箱可精準模擬腫瘤低氧微環境，為藥敏實驗提供了可靠的技術支持。低氧條件下，胰腺癌細胞通過HIF-1α和Akt通路激活產生耐藥性，與既往研究一致。博清生物培養箱的高精度氣體控制（O?±1%）和穩定性（溫度±0.2℃）顯著提升了實驗的可重復性，其無菌設計（HEPA過濾和紫外線殺菌）適用于長期藥物篩選。

值得注意的是，結合3D腫瘤球體或類器官模型時，博清生物科技（南京）有限公司研發的三氣培養箱可進一步模擬實體瘤的復雜結構，為個體化治療提供更貼近臨床的評估平臺。例如，在低氧條件下測試靶向HIF-1α的藥物，或結合免疫細胞共培養研究微環境互作，均需依賴穩定的氣體調控系統。

博清生物科技（南京）有限公司研發的三氣培養箱通過精準模擬腫瘤低氧微環境，為腫瘤藥敏實驗提供了高效、可靠的技術平臺。其氣體控制精度、穩定性和無菌設計顯著提升了實驗的科學性，為個體化治療的藥物篩選提供了新的工具。未來可進一步探索其在3D培養、類器官模型及聯合治療中的應用，推動腫瘤研究的發展。