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熒光定量PCR儀


更新時(shí)間:2025/08/29 文章來(lái)源:今發(fā)布網(wǎng) 瀏覽:1023 編輯:boqinglab 搜索看看


熒光定量PCR儀是一種用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA擴(kuò)增過(guò)程的高通量設(shè)備,支持快速檢測(cè)、定量分析和多通道熒光信號(hào)采集,廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)研究、病原體檢測(cè)和分子診斷等領(lǐng)域。其核心功能包括精準(zhǔn)溫控、多目標(biāo)同步檢測(cè)及自動(dòng)化數(shù)據(jù)分析。

一、工作原理與核心功能

熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)通過(guò)在擴(kuò)增過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線或閾值循環(huán)數(shù)(Ct值)對(duì)目標(biāo)核酸進(jìn)行定量。采用96孔板設(shè)計(jì),可同時(shí)處理多個(gè)樣本,顯著提升檢測(cè)效率。其溫控系統(tǒng)通過(guò)半導(dǎo)體模塊或帕爾貼元件實(shí)現(xiàn)快速升降溫(如0.1℃精度),確保擴(kuò)增反應(yīng)的高特異性。設(shè)備通常配備4-6個(gè)熒光檢測(cè)通道,兼容SYBR Green、TaqMan探針等不同熒光標(biāo)記方式,支持多靶標(biāo)檢測(cè)。

二、主要應(yīng)用場(chǎng)景

1、基因表達(dá)分析:通過(guò)相對(duì)或絕對(duì)定量,研究特定基因在不同條件下的表達(dá)水平差異。

2、病原體檢測(cè):快速識(shí)別病毒(如新冠病毒)、細(xì)菌或真菌的核酸,用于臨床診斷或流行病學(xué)調(diào)查。

3、轉(zhuǎn)基因檢測(cè):定量分析食品或作物中的轉(zhuǎn)基因成分。

4、突變鑒定與SNP分型:結(jié)合探針設(shè)計(jì),檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性或基因突變。

二、性能與操作特點(diǎn)

1、高通量與靈活性:96孔板適配多層次實(shí)驗(yàn)需求,支持單孔獨(dú)立編程,適合大規(guī)模篩查或小樣本研究。

2、靈敏度與線性范圍:可檢測(cè)低至單拷貝的核酸,動(dòng)態(tài)范圍通常跨越10個(gè)數(shù)量級(jí)。

3、數(shù)據(jù)分析軟件:內(nèi)置軟件自動(dòng)生成擴(kuò)增曲線、熔解曲線,并提供閾值設(shè)定、標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合及結(jié)果導(dǎo)出功能,簡(jiǎn)化操作流程。

三、使用注意事項(xiàng)

1、避免交叉污染:實(shí)驗(yàn)前需分區(qū)操作(試劑配制、樣本處理、擴(kuò)增檢測(cè)),使用帶濾芯槍頭。

2、反應(yīng)體系優(yōu)化:需根據(jù)引物濃度、模板質(zhì)量調(diào)整反應(yīng)條件,減少非特異性擴(kuò)增。

3、定期校準(zhǔn):對(duì)光路、溫控模塊進(jìn)行周期性校準(zhǔn),確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

四、維護(hù)與保養(yǎng)

1、清潔與消毒:每次使用后清理孔板槽,避免殘留污染;表面用75%乙醇擦拭。

2、光學(xué)系統(tǒng)維護(hù):定期檢查激發(fā)光源和檢測(cè)器性能,防止信號(hào)衰減。

3、軟件更新:及時(shí)升級(jí)控制程序和分析工具,兼容新型熒光染料或?qū)嶒?yàn)需求。

該設(shè)備通過(guò)整合高效溫控、多通道檢測(cè)及智能化分析,為分子生物學(xué)研究和臨床檢測(cè)提供了可靠工具。用戶需結(jié)合實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)合理選擇探針類(lèi)型、反應(yīng)程序及數(shù)據(jù)分析方法,以充分發(fā)揮其性能優(yōu)勢(shì)。


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