激素與代謝指標是評估機體內分泌功能及代謝狀態(tài)的核心生物標志物，其檢測結果的準確性直接影響內分泌疾病（如甲狀腺功能異常、糖尿病）、代謝綜合征（如肥胖、高血脂）等領域的科研結論。目前，科研中常用的檢測技術包括高效液相色譜法（HPLC）、質譜法（MS）及酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）：HPLC 與 MS 雖靈敏度高，但設備成本昂貴、操作流程復雜且檢測周期長，難以滿足中小實驗室批量樣本的常規(guī)檢測需求；而ELISA因操作簡便、通量高、成本可控等優(yōu)勢，成為科研中激素與代謝指標檢測的主流技術。

酶標儀作為ELISA的核心配套設備，其光學性能（如波長準確性、吸光度穩(wěn)定性）與數據處理能力直接決定檢測結果的可靠性。博清生物科技（南京）有限公司作為國內體外診斷設備領域的代表性企業(yè)，其研發(fā)的酶標儀采用了雙波長檢測技術及自動校正功能，宣稱可滿足科研級檢測需求，但目前關于該設備在激素與代謝指標檢測中的系統(tǒng)性性能驗證研究尚未見報道。

一、材料與方法

（一）實驗儀器

1、主檢測儀器：博清生物酶標儀；

2、對照儀器：品牌酶標儀；

3、輔助設備：高速離心機、恒溫水浴箱、超低溫冰箱。

（二）實驗試劑與樣本

1、ELISA試劑盒：胰島素、皮質醇、T3、T4、TG、FBG；

2、標準品與質控品：均為試劑盒配套產品，高、中、低3個濃度水平；

3、樣本來源：SPF級SD大鼠。大鼠禁食12h后腹腔注射10%水合氯醛（3mL/kg）麻醉，腹主動脈取血，3000r/min 離心15min分離血清，-80℃保存待測，共收集30份樣本。

（三）實驗方法

1、樣本檢測流程

嚴格按照ELISA試劑盒說明書操作，具體步驟如下：

樣本復溶：將冷凍血清樣本置于4℃冰箱解凍，室溫平衡30min后輕輕混勻；

加樣：向96孔板中加入標準品（50μL/孔）、質控品（50μL/孔）、樣本（50μL/孔），空白孔加等量PBS；

孵育與洗板：每孔加酶標二抗（50μL/孔），37℃恒溫水浴箱孵育60min；孵育結束后，用洗滌液洗板5次，每次浸泡30s，拍干殘留液體；

顯色與終止：每孔加底物溶液（100μL/孔），37℃避光孵育15min；加終止液（50μL/孔），輕輕混勻；

2、性能驗證指標與數據分析

精密度：選取高、中、低3個濃度的質控品，每個濃度重復檢測10次（批內），連續(xù)檢測5天（批間），計算批內CV（公式：CV=（標準差/均值）×100%）與批間CV，CV<5%為合格；

準確度：采用加標回收實驗，向已知濃度的大鼠血清樣本中加入高、中、低3個濃度的標準品，每個濃度平行檢測3次，計算回收率（公式：回收率=（加標后檢測濃度-加標前檢測濃度）/加標量×100%），回收率85%-115%為合格；

結果一致性：對30份大鼠血清樣本進行平行檢測，以檢測結果為橫坐標，博清生物酶標儀檢測結果為縱坐標，繪制散點圖并進行Pearson相關性分析，R2>0.95為一致性良好；

線性范圍：將各指標標準品按濃度梯度稀釋（0、1/8、1/4、1/2、1、2倍標準品濃度），檢測OD值，以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制標準曲線，計算線性相關系數r，r>0.99為線性良好。

所有數據采用SPSS 26.0軟件分析，計量資料以“均值±標準差（x±s）”表示，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

二、結果

（一）博清酶標儀的精密度驗證

博清生物酶標儀檢測6項指標的批內CV為1.23%-3.85%，批間CV為1.89%-4.52%，均低于5%的合格標準，其中胰島素、T3的CV值最低（批內<2%，批間<3%），表明該儀器在激素與代謝指標檢測中具有良好的重復性與穩(wěn)定性。

（二）博清酶標儀的準確度驗證

6項指標的加標回收率為88.6%-109.2%，均處于85%-115% 的合格范圍內，其中胰島素、T3、T4的回收率更接近100%（92.5%-105.3%），表明博清生物酶標儀檢測結果的準確性良好，可真實反映樣本中指標的實際濃度。

（三）博清酶標儀與參比儀器的結果一致性

檢測30份大鼠血清樣本的結果呈顯著正相關，6項指標的相關系數R2均>0.98（P<0.001），其中胰島素（R2=0.992）、T3（R2=0.991）的一致性最佳，TG（R2=0.983）、FBG（R2=0.985）的一致性略低但仍符合科研要求，表明博清酶標儀的檢測結果與國際主流品牌儀器具有高度一致性，可用于科研數據的橫向對比。

（四）博清酶標儀的線性范圍驗證

各指標標準曲線的線性相關系數r均>0.99，其中胰島素（r=0.998）、T4（r=0.997）的線性關系最穩(wěn)定，TG（r=0.992）的線性略低但仍滿足ELISA檢測要求，表明博清生物酶標儀在試劑盒規(guī)定的濃度范圍內，可準確擬合標準曲線，實現(xiàn)樣本濃度的精準計算。

三、討論

激素與代謝指標的精準檢測是內分泌及代謝科研的基礎，而酶標儀的性能直接決定檢測結果的可靠性。本研究從精密度、準確度、結果一致性及線性范圍4個核心維度，系統(tǒng)驗證了博清生物酶標儀的科研適用性，結果表明該儀器可滿足激素與代謝指標的常規(guī)檢測需求，具體優(yōu)勢如下：

（一）性能穩(wěn)定，滿足科研級檢測標準

本研究中，博清生物酶標儀的批內CV<4%、批間CV<5%，顯著低于ELISA檢測的行業(yè)CV上限（通常為10%），表明其在重復檢測中具有良好的穩(wěn)定性；加標回收率88.6%-109.2%，符合“85%-115%”的準確度要求，可避免因儀器誤差導致的檢測結果偏離；與國際主流品牌酶標儀的R2>0.98，說明其結果可與現(xiàn)有科研數據兼容，降低了設備更換導致的數據偏差風險。

（二）操作便捷，適配科研批量檢測場景

博清生物酶標儀支持96孔板同時檢測，單批次檢測時間<30min（含OD值讀取與數據計算），且具備自動波長校正及標準曲線擬合功能，可減少人工操作誤差；此外，該儀器與國內主流ELISA試劑盒兼容性良好，無需額外調整檢測參數，降低了科研人員的操作門檻，尤其適合中小實驗室的批量樣本檢測。

（三）成本可控，性價比優(yōu)勢顯著

相較于國際主流品牌酶標儀成本較高，博清生物酶標儀的采購成本更低，且耗材（如檢測板、洗滌液）可適配國產試劑，進一步降低科研成本。對于經費有限的中小實驗室或需要多臺設備并行檢測的團隊，該儀器可在保證檢測質量的前提下，提升科研資源的利用效率。

（四）研究局限性與未來方向

本研究存在以下局限性：①樣本類型僅為大鼠血清，未涵蓋人血清、血漿或組織勻漿等其他科研常用樣本，未來需進一步驗證儀器在不同樣本類型中的適用性；②檢測指標僅包含6項核心指標，未涉及性激素（如雌激素、睪酮）、 adiponectin等新興代謝標志物，需擴展指標范圍以覆蓋更多科研場景；③未評估儀器在長期使用（如1年以上）后的性能衰減情況，需開展長期穩(wěn)定性監(jiān)測。

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的酶標儀在激素與代謝指標檢測中具有良好的精密度、準確度及結果一致性，線性范圍穩(wěn)定，且操作便捷、成本可控，可作為內分泌及代謝相關科研的常規(guī)檢測設備。未來可通過擴展樣本類型、增加檢測指標及長期穩(wěn)定性驗證，進一步提升該儀器的科研應用場景覆蓋度。