分光光度法是基于物質對特定波長光的吸收特性進行定量分析的經典方法，其核心步驟——顯色反應對溫度變化極為敏感。溫度過高可能導致顯色劑分解或反應過度，溫度過低則會使反應速率減緩、顯色不完全，二者均會造成吸光度測定偏差，影響最終分析結果。因此，選擇一款溫度控制精度高、穩定性強的溫控設備，是保障分光光度法實驗成功的關鍵。

博清生物科技（南京）有限公司作為專注于實驗室設備研發的企業，其生產的電熱恒溫水浴鍋采用微電腦智能溫控系統，具備溫度設定范圍寬（室溫-100℃）、控溫精度高、加熱均勻等特點。

一、實驗部分

（一）實驗儀器與試劑

1、主要儀器：博清生物電熱恒溫水浴鍋；紫外可見分光光度計；電子分析天平；移液管；容量瓶。

2、主要試劑：鄰二氮菲；硫酸亞鐵銨；鹽酸；醋酸-醋酸鈉緩沖溶液（pH=5.0）；實驗用水為超純水。

（二）實驗原理

本實驗以鄰二氮菲分光光度法測定鐵離子含量為例，驗證博清生物電熱恒溫水浴鍋的應用效果。在pH=5.0的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中，Fe2?與鄰二氮菲發生顯色反應，生成穩定的橙紅色絡合物[Fe(phen)?]2?，該絡合物在510nm波長處具有最大吸光度。根據朗伯-比爾定律，在一定濃度范圍內，絡合物的吸光度與Fe2?濃度呈線性關系，通過測定吸光度即可計算出樣品中鐵離子的含量。

該顯色反應的最佳溫度為25℃，溫度波動需控制在±0.5℃以內，否則會導致絡合物生成量變化，影響吸光度測定結果。因此，實驗中需通過博清生物電熱恒溫水浴鍋精準控制顯色反應溫度，確保反應條件的一致性。

（三）實驗方法

1、標準溶液配制

準確稱取0.1961g硫酸亞鐵銨，用1mol/L鹽酸溶解后，轉移至100mL容量瓶中，用超純水定容至刻度，得到濃度為0.005mol/L的Fe2?標準儲備液。

分別移取0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL Fe2?標準儲備液至5個50mL容量瓶中，各加入5mL醋酸-醋酸鈉緩沖溶液（pH=5.0）和2mL 0.1%鄰二氮菲溶液，搖勻后備用。

2、顯色反應溫度控制

將上述5個容量瓶分別放入博清生物電熱恒溫水浴鍋中，設定水浴溫度為25℃，待水浴溫度穩定后（顯示屏顯示溫度波動≤±0.1℃），保持恒溫反應15min，確保顯色反應充分進行。

同時，設置對照組實驗：采用傳統普通水浴鍋（控溫精度±1℃），同樣設定溫度為25℃，對相同濃度的標準溶液進行顯色反應，反應時間相同。

3、吸光度測定

顯色反應結束后，將容量瓶取出，用超純水定容至刻度，搖勻。以空白溶液（不加Fe2?標準液，其余試劑相同）為參比，在510nm波長處，用分光光度計分別測定兩組實驗（博清生物水浴鍋組、傳統水浴鍋組）中各標準溶液的吸光度。

每組實驗平行測定3次，計算平均吸光度，并繪制標準曲線，計算線性回歸方程及相關系數（R2）。

4、溫度穩定性與重復性驗證

為進一步驗證博清生物電熱恒溫水浴鍋的溫度穩定性，在25℃、30℃、35℃三個溫度點，分別持續監測1h，記錄溫度變化數據，計算溫度波動范圍。

選取濃度為0.00002mol/L的Fe2?標準溶液，在博清生物水浴鍋中進行6次平行顯色反應實驗，測定吸光度并計算相對標準偏差（RSD），驗證實驗重復性。

二、結果與討論

（一）溫度控制精度分析

通過對博清生物電熱恒溫水浴鍋在25℃、30℃、35℃三個溫度點的1h持續監測，博清生物電熱恒溫水浴鍋在不同設定溫度下，溫度波動范圍均控制在±0.1℃以內，完全滿足分光光度法顯色反應對溫度精度的要求（±0.5℃）。相比之下，傳統普通水浴鍋在相同溫度點的溫度波動范圍為±1℃，無法保證顯色反應條件的一致性，易導致實驗誤差。

（二）標準曲線與線性關系

兩組實驗（博清生物水浴鍋組、傳統水浴鍋組）的標準曲線參數，博清生物水浴鍋組的標準曲線相關系數R2=0.9998，接近1，表明Fe2?濃度與吸光度的線性關系極佳；而傳統水浴鍋組的R2=0.9975，線性關系相對較差。這是因為博清生物水浴鍋的精準溫控確保了顯色反應充分且一致，絡合物生成量穩定，從而使吸光度與濃度的線性相關性更高；而傳統水浴鍋的溫度波動導致部分樣品顯色不完全，吸光度測定值出現偏差，線性關系下降。

（三）實驗重復性驗證

對濃度為0.00002mol/L的Fe2?標準溶液進行6次平行實驗，博清生物水浴鍋組的吸光度測定結果，6次平行實驗的吸光度平均值為0.2295，相對標準偏差RSD=0.48%，遠低于分析化學實驗中對重復性的要求（RSD≤5%）。這一結果表明，在博清生物電熱恒溫水浴鍋的精準溫控下，顯色反應的重復性極佳，能夠有效避免因溫度波動導致的實驗數據離散性，為科研實驗提供穩定可靠的結果。

（四）誤差分析與優勢總結

對比兩組實驗結果，傳統水浴鍋組因溫度波動較大，導致顯色反應不完全或過度，使吸光度測定值的相對誤差最大可達5.2%；而博清生物水浴鍋組的相對誤差僅為0.8%，顯著降低了實驗誤差。

博清生物電熱恒溫水浴鍋的優勢主要體現在以下三方面：

1、高精度溫控：±0.1℃的控溫精度能夠精準匹配顯色反應的最佳溫度條件，確保反應充分且一致；

2、穩定的溫度環境：采用循環加熱方式，水浴槽內溫度分布均勻，無局部溫差，避免了因溫度不均導致的樣品間差異；

3、智能操作與監控：配備高清顯示屏，實時顯示溫度數據，支持溫度設定與校準，操作便捷，便于實驗過程中的溫度監控與記錄。

本研究以鄰二氮菲分光光度法測定鐵離子含量為實驗模型，系統探究了博清生物科技（南京）有限公司研發的電熱恒溫水浴鍋在分光光度法顯色反應中的應用效果。實驗結果表明：

該水浴鍋可實現±0.1℃的溫度控制精度，溫度穩定性優異，能夠為顯色反應提供恒定的溫度環境；

在其溫控條件下，顯色反應充分且一致，標準曲線的相關系數高達0.9998，線性關系良好；

實驗重復性佳，吸光度測定結果的相對標準偏差僅為0.48%，顯著降低了實驗誤差，提高了分析結果的準確性。

博清生物科技（南京）有限公司研發的電熱恒溫水浴鍋能夠滿足分析化學實驗中分光光度法顯色反應對溫度控制的嚴格要求，為科研人員提供穩定、可靠的實驗條件，對提升分光光度法分析結果的可信度與科研數據的質量具有重要意義，值得在分析化學科研領域廣泛推廣應用。